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本生闡述影響ELISA試劑盒靈敏度出現問題及解決辦法

更新時間:2023-10-10    點擊次數:1435

  本生闡述影響ELISA試劑盒靈敏度出現問題及解決辦法


  ELISA試劑盒試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。BUNSEN本生技術小編詳解:將操作中各個環(huán)節(jié)常出現問題的原因及解決辦法總結一下,以期給同行帶來—些啟發(fā),提高試驗質量。

  1、超過有效期。試劑盒必須在有效期內使用,超過有效期的產品可能會產生很弱的信號。

  2、試劑盒沒有按規(guī)定進行保存,受高溫影響。

  3、試劑、樣品用前未平衡至室溫

  4、加入試劑的體積和時間有誤,移液器計量不準,吸嘴內水分太多或不清潔。

  5、洗板及加樣過程中,酶標受污染失活而失去催化顯色劑顯色的能力,

  6、孵育時間及孵育溫度未達到要求,反應板放入培養(yǎng)箱時注意溫度并及時調整。

  7、洗板次數過多,或濃縮洗液稀釋倍數不符合要求,洗滌沖擊力太大,浸泡時間太長等,

  8、顯色劑加量不足或順序顛倒,或混合后加入。

  9、底物作用時間不夠,

  10、燕餾水水質有問題


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  ELISA試劑盒靈敏度出現問題相應的解決方法

  1、實驗前檢查試劑的組分及批號,確認試劑未過期,

  2、不要將試劑盒長時間置于常溫下,按便用規(guī)定儲藏。

  3、試劑、樣品用前平衡至室溫

  4、確定所使用的試劑體積正確,加入時間適當。校正移液器,移液器與吸晚配合要緊密吻合。移液不宣太快,盡量排放完。

  5、確認盛酶標的容器不含酶抑制劑如愛氮鈉等,確認配制洗液的容器已洗千凈,確認配制洗液的純化水達到要求且未受污染。

  6、孵育溫度應控制在37-38C,孵育時間嚴格按照說明書操作。保溫期內不宜多開門,以免影響保溫。

  7、嚴格按說明書要求稀釋濃縮洗液及洗板,減小洗滌沖擊力,按說明書要求置留洗滌液時間和洗滌次數,

  8、顯色劑滴瓶垂直向下,持力均勻,滴速不宜過快,先加顯色劑A,后加顯色劑B,不可將A、B液混合。

  9、準確定時。

  10、測定燕餾水配制試劑對酶免疫法的影響。

  ELISA試劑盒 本生是實驗室本生一直視質量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過硬的質量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。

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